製品の特長

臓器移植後にレシピエントの血中に存在するドナー由来cell-free DNA（dd-cfDNA）は移植臓器片に由来するため、ドナー由来cell-free DNAは臓器移植後の拒絶反応のバイオマーカーとして使用できることが示唆されています。Devyser Accept cfDNAはレシピエント血漿中に存在するdd-cfDNAを高感度に検出することが可能な試薬です。

本キットではまずスクリーニング検査で50マーカーの内、ドナーおよびレシピエントに存在するユニークな遺伝子マーカーを選定します。その後モニタリング検査で移植後のレシピエントに存在するドナー由来遺伝子マーカーの割合を測定します。

• NGS（Illuminaシーケンサー）を利用したシンプルかつ簡単な試薬
• 1ウェルで検体中の50マーカーを増幅
• スクリーニング検査、モニタリング検査の両方を同じプロトコルで実施可能
• 高い検出感度と精度：検出限界（LOD₉₅/LOQ₉₅）0.1%
• 専用ソフトウェアで迅速な解析

試薬について

アッセイには下記3種類の試薬が必要となります。

• Devyser Accept cfDNA（商品コード：OLI-8-A410-8または24）: プライマー、ライブラリ作成試薬など
• Devyser Index Plate LB-A（商品コード：OLI-8-A202）: サンプルバーコード試薬
• Devyser Library Clean（商品コード：OLI-8-A204）: ライブラリ精製ビーズとバッファー

操作方法

ライブラリ作成におけるハンズオンは45分です。PCRから解析結果取得までの全体のワークフローは2日以内で完了します。

スクリーニング検査には全血由来のゲノムDNA、モニタリング検査には血漿中のcfDNAを使用します。

※cfDNAの解析はStreck採血管Cell-Free DNAで回収された血液で検証されています。

① マルチプレックスPCR：50種の遺伝子マーカーを1ウェルで増幅
② バーコード付加：サンプル識別用のバーコードを付加し、プール
③ ライブラリ精製：マグネットビーズを使用し精製
④ シーケンス：Illuminaシーケンサーを用いたシーケンス
⑤ 解析：専用ソフトウェアAdvyser Solid organsで解析、レポート出力

Devyser Accept cfDNAの使用例

Detection of donor-derived cell-free DNA in the setting of multiple kidney transplantations (Petterson et al., Front. Immunol., 22 February 2024)