STEMCELL Technologies STEMdiff STEMdiff Ventricular Cardiomyocyte Differentiation Kit
「STEMdiff™ Cardiomyocyte Differentiation Kit」から商品名が変わりました。培地の組成に変更はありません。(2022/3/3)
- 研究用
STEMdiff™ Ventricular Cardiomyocyte Differentiation Kit(ST-05010)は、ヒトES/iPS細胞(ヒト多能性幹細胞 [hPSC])を心筋細胞(心筋トロポニンT陽性[cTnT+])に分化させる培地、ならびにhPSC由来心筋細胞を維持する培地を含む無血清のキットです。
本品は、mTeSR™1(ST-85850)、mTeSR™ Plus (ST-100-0276)、TeSR™-AOF (ST-100-0401) または TeSR™-E8™(ST-05990)で維持したhPSCのクランプ培養から、心筋細胞を作製できます。これらの細胞の80%以上がcTnT+になります。12ウェルプレートの1ウェルあたり、平均 1 x 106個の細胞を回収可能です。
本品で作製したhPSC由来心筋細胞は、STEMdiff™ Cardiomyocyte Maintenance Kit(ST-05020)で1ヶ月以上の長期に維持培養でき、さまざまな下流の用途や解析に使用できます。
製品の特長
STEMdiff™ Ventricular Cardiomyocyte Differentiation Kitで、hPSCを心室性心筋へ分化
- 完全: hPSC由来心筋細胞の全ワークフローをサポート
- 簡便: 簡単な単層プロトコルにより、15日間で心筋細胞を作製
- 高収率: 1キットあたり、5×106個を超えるcTnT陽性心筋細胞を回収
- 標準化: 複数のhPSC株に対する一貫した性能、最小限のばらつき
心筋細胞分化の流れ
アプリケーション例
- アカデミア・研究室向け
・心筋細胞の生理学、電気生理学およびCa2+動態研究
・in vitro 疾患モデル(不整脈、遺伝的および薬理学的に誘導した機能不全など)
・全ゲノム関連解析/GWAS(遺伝的多様性と心臓表現型をリンク)
・hPSC由来心筋細胞を用いた細胞療法 / 置換法についての前臨床研究
- インダストリー向け
・創薬スクリーニング
・ドラッグリポジショニング
・心毒性アッセイ(開発中の薬物試験に必須)
・セルバンキング
データ紹介
hPSC由来心筋細胞の形態
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STEMdiff™ Ventricular Cardiomyocyte Differentiation Kitをもちいた(A)hES(H9)細胞および(B)hiPS(WLS-1C)細胞からの心筋分化15日目の代表的画像。分化した細胞は典型的な心筋細胞の形態、つまり、拍動する接着細胞が密に詰まったクモの巣状の単層を示した。
(C)STEMdiff Cardiomyocyte Differentiation Kitで作製したhPSC由来心筋細胞の代表的な共焦点顕微鏡画像(緑:cTnT、青:核のDAPI染色)。
効率的でロバストなcTnT陽性心筋細胞の作製
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STEMdiff™ Ventricular Cardiomyocyte Differentiation Kitで、12ウェルプレートの単一ウェル中で15日間培養したhESおよびhiPS細胞。培養期間の終わりに細胞を回収し、cTnT陽性細胞をフローサイトメトリーで分析した。
(A)培養したhES(H9)細胞およびhiPS(WLS-1C and STiPS-M001)細胞の心筋細胞マーカーcTnTのヒストグラムの分析結果。
(B,C)培養したhES/hiPS細胞のcTnT陽性細胞のパーセンテージおよび全細胞数(Data shown as mean ± SEM; n=3.)
ロバストで安定したhPSC由来心筋細胞の興奮性プロファイル
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STEMdiff™ Ventricular Cardiomyocyte Differentiation KitおよびSTEMdiff™ Cardiomyocyte Maintenance Kitで27日間培養したhPSC由来心筋細胞をもちいて、微小電極アレイ(MEA)で電圧を記録した。hPSC由来心筋細胞は、特徴的な電気波形と一定の拍動速度を示した。刺激伝導系のような、脱分極による大きな波形の後に再分極による小さな波形が観察された。
MEAによる測定データはこちら:
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