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STEMCELL Technologies EasySep EasySep Release Human CD45 Positive Selection Kit

  • 研究用

EasySep Release Human CD45 Positive Selection Kit(ST-100-0105)は、ポジティブ分離によりヒトのプライマリー組織や腫瘍の単一細胞懸濁液からCD45陽性の白血球を分離するように設計されています。

目的の細胞は抗体と磁性粒子で標識され、EasySep™マグネットを使用してカラムフリーに分離されます。不要な細胞は簡単なデカンテーション操作で洗い流され、目的の細胞はチューブに残ります。分離されたCD45陽性細胞からは結合した磁性粒子が除去され、下流の実験系にすぐに利用できます。本キットによる分離後、抗体複合体は細胞表面に結合したままで、Brilliant Violet™抗体コンジュゲートや、ポリエチレングリコール修飾タンパク質、またはその他の化学的に関連するリガンドと相互作用する可能性があります。

2018/05/14 12:00の製品情報

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本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。

製品の特長

データ

EasySep Release Human CD45 Positive Selection Kitをもちいて、ヒト腫瘍移植片サンプルからビーズフリーの高純度なCD45陽性細胞(TIL)をポジティブ分離!

NRG-3GSヒト化マウスからのヒト乳癌腫瘍異種移植片(MDA-MB-231)を含む単一細胞懸濁液をサンプルとして使用しました。開始および最終分離画分のCD45+ TIL純度は、それぞれ5.5%および96.0%となりました。
注:細胞片と死細胞は、DRAQ5™とDAPI蛍光に基づく分析によって除外しております。

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EasySep™で分離されたCD45陽性細胞は、分離前の白血球集団の免疫サブセット構成を維持しています

全血から、Lymphoprep™を使用した密度勾配遠心分離によりPBMCを調製しました。EasySep™分離の前後で免疫サブセット組成を比較するために、EasySep Release Human CD45 Positive Selection Kitを使用してPBMCの一部をさらに分離し、分離前と分離後の画分をマスサイトメトリー(CyTOF®)で評価しました。19個のマーカーで染色され、CyTOF®で分析された細胞のt-SNEプロットが表示されます (n = 1)。

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EasySepによって分離されたCD45陽性細胞は、抗原およびマイトジェンの刺激に応答してIFN-γを産生します

EasySep分離の前後において、PBMCは、ペプチドプール(抗原特異的CD8+ T細胞応答にはCEF、抗原特異的CD4+ T細胞応答にはCPI)またはマイトジェン(フィトヘマグルチニン[PHA])の存在下で24時間インキュベートされました。インキュベーション後、ELISpotプレートを処理し、IFN-γ産生細胞をAID ELISpotリーダーを使用してカウントしました。 ELISpotアッセイの代表的な画像を示します(n = 3).

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EasySep™によってさまざまな組織からCD45陽性細胞を分離し、精製することができます

ヒト化マウス腫瘍モデルは、NRG-3GSマウスへのヒトCD34+造血幹細胞および前駆細胞の生着と、それに続くヒト癌細胞株、MDA-MB-231(乳癌)またはSKOV-3(卵巣癌)の異種移植によって生成されました。脾臓、肺、骨髄、または腫瘍の単一細胞懸濁液から、EasySep Release Human CD45 Positive Selection Kitを使用してヒトCD45+白血球を分離しました。個々の実験および平均のヒトCD45+細胞の開始時の頻度および単離された細胞の純度が示されております。

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