FAQ
- 用途別細胞培養
- ALDEFLUORで基質として用いるBAAA（Bodipy-aminoacetaldehyde）を触媒しうるALDHには、どのような種類がありますか？
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Aldehyde dehydrogenase（ALDH）はin vivoでretinaldehydeを基質とする酵素群です(Sladek N et al. J Biochem Molecular Toxicol. 17(1):7-23, 2003)。
ALDHはレチノールをレチノイン酸（RA）に酸化することによって初期分化過程で役割を果たしていると考えられます。RAは細胞分化に関わる複数のターゲット遺伝子の転写を制御します。
上記論文の時点で3クラス、17アイソザイムのALDHが報告されていましたが、その後多くのアイソザイムが見つかっています。ALDEFLUORはおもに（独占的にではない）Class I family of ALDH isozymes (ALDH 1A1)に反応します。ヒトのALDH 1A1は以下の反応を触媒することが知られています。
ALDH＋BAAA（Bodipy-aminoacetaldehyde）→ BAA-（Bodipy-aminoacetate）
ALDEFLUOR substrateのBAAAはALDHに結合し、BODIPY分子は単にタグとして働きます。ALDEFLUOR Kitのパフォーマンスは、他の酵素（ヒトのスーパーファミリー酵素、他の動物種）では明らかにされていません。多くの組織で数種類のALDHが発現していますが、それらがALDEFLUOR substrateを酸化できるかは不明です。もしsubstrateが酸化されないと細胞内に保たれないのでALDEFLUORアッセイが機能しません。ALDHの基質についての総説（Dolle, et al. American Journal of Physiology 308: 573-578, 2015）に挙げられている文献もご参考ください。
参考文献：- Sladek N, et al. Human aldehyde dehydrogenases: potential pathological, pharmacological and toxicological impact. J Biochem Molecular Toxicol. 17(1):7-23, 2003.
- Dolle, et al. Next generation of ALDH substrates and their potential to study maturational lineage biology in stem and progenitor cells. American Journal of Physiology 308:573-578, 2015.
- Yoshida, et al. Human aldehyde dehydrogenase gene family. Eur J biochem 251: 549-557, 1998.
- Vasiliou and Nebert. Analysis and update of the human aldehyde dehydrogenase (ALDH) gene family. Hum Genomics 2:138-143, 2005.
