ログインVERI+CLUB へログインが必要です。
メールアドレス
パスワード

パスワードを忘れた方

ラーニングコーナー

2000/02/14

Method Library -細胞分離-

  • 用途別細胞培養

This page is under construction!

ラボの基本

ラボを初めて使用する場合でも、知識を更新する必要がある場合でも、参照する基礎研究手法に関するリソースがあると便利です。細胞培養、基本的な細胞分離法、基本的な細胞アッセイ、またはその他の重要な分子生物学技術の概要については、ここから始めてください。

Protocol 全血から単核細胞を密度勾配遠心で分離する方法
シングルセル懸濁液中の細胞凝集をDNase Iで減らす方法
古い血液サンプルから顆粒球を除去する方法
全血からバフィーコートを調製する方法
Tech Tip 細胞の遠心分離に適した速度と時間
細胞分離用サンプルの評価と回収率の計算
血小板コンタミネーションの低減
ネガティブ分離とポジティブ分離の使い分け
細胞分離技術(STEMCELL Technologies社)の違いと選択

細胞分離法

遠心分離
遠心分離の時間と条件は、開始サンプル、分離方法、および分離する細胞タイプによって異なります。セル分離プロトコルをニーズに合わせてカスタマイズするためのガイダンスについては、これらのリソースを参照してください。また、特定のワークフロー用に最適化されたさまざまな細胞分離テクノロジーのサポートもあります。

Protocol 特定の細胞サブセットを免疫比重分離する方法
古い血液サンプルから顆粒球を除去する方法
全血からバフィーコートを調製する方法
シングルセル懸濁液の細胞凝集をDNase Iで減らす方法
全血から単核細胞を密度勾配遠心で分離する方法
Tech Tip 細胞分離に適した密度勾配溶液の選択
血小板コンタミネーションの低減
細胞分離技術(STEMCELL Technologies社)の違いと選択
細胞分離用サンプルの評価と回収率の計算
細胞の遠心分離に適した速度と時間
造血前駆細胞の分離製品と選択
臍帯血CD34+細胞のカラムを使わない分離
血中循環腫瘍細胞(CTC)の分離製品と選択
Technical Bulletin 全血からのハイスループットな細胞サブセット分離
ヒト臍帯血からのCD34 +細胞の分離
Video 全血から末梢血単核細胞(PBMC)を15分で分離:SepMate
全血からカラムや磁石を使わずに細胞を免疫比重分離:RosetteSep
遠心1回だけの細胞分離:SepMate, RosetteSep

免疫密度細胞分離
赤血球ロゼットとも呼ばれる免疫密度細胞分離は、抗体ベースの標識と密度勾配遠心分離を組み合わせたネガティブセレクション法です。これらのリソースを調べて、免疫密度細胞分離プロトコルを合理化して最大限に活用する方法を学びましょう。サンプルの処理時間を短縮する方法や、カラムや磁石を使用せずに特定の細胞サブセットを血液から直接分離する方法などのトピックに関する技術的なヒントとプロトコルを見つけることができます。

Protocol 特定の細胞サブセットを免疫比重分離する方法
古い血液サンプルから顆粒球を除去する方法
全血から多形核細胞(顆粒球)を塩化アンモニウム溶血で調製する方法
Tech Tip 細胞分離に適した密度勾配溶液の選択
細胞分離技術(STEMCELL Technologies社)の違いと選択
細胞分離用サンプルの評価と回収率の計算
細胞の遠心分離速度と時間
造血前駆細胞の分離製品と選択
血中循環腫瘍細胞(CTC)の分離製品と選択
Technical Bulletin 全血からのハイスループットな細胞サブセット分離
ヒト臍帯血からのCD34 +細胞の分離
Video 全血から末梢血単核細胞(PBMC)を15分で分離:SepMate
全血からカラムや磁石を使わずに細胞を免疫比重分離:RosetteSep
遠心1回だけの細胞分離:SepMate, RosetteSep

ポジティブセレクションによる免疫磁気細胞分離
ポジティブセレクション免疫磁気細胞分離法は、特定の細胞表面タンパク質を標的とする抗体またはリガンドを使用して、選択のために所望の細胞を直接標識することを含みます。ポジティブセレクションによる免疫磁気細胞分離に関する技術的なヒントとサポートについては、これらのリソースをご覧ください。ポジティブまたはネガティブセレクション戦略の選択方法、細胞枯渇のためのポジティブセレクションの使用などのトピックに関する情報を見つけることができます。

Tech Tip 細胞分離技術(STEMCELL Technologies社)の違いと選択
ポジティブ分離した細胞からのDNAとRNAの抽出
FcRブロッキングの重要性
同一サンプルから複数細胞タイプを連続分離
細胞分離用サンプルの評価と回収率の計算
多様な組織サンプルからの細胞分離
細胞分離に適したバッファー組成と血清の代替
ポジティブ分離製品をもちいた細胞ディプリーション
標識抗体と間接分離であらゆる細胞を分離
複数サンプルから同時に細胞分離できる磁石:EasyEights
造血前駆細胞の分離製品と選択
臍帯血CD34+細胞のカラムを使わない分離
血中循環腫瘍細胞(CTC)の分離製品と選択
RoboSep-SとEasySep磁石の清掃
標識抗体をもちいた間接分離の最適化(EasySep Release)
ネガティブ分離とポジティブ分離の使い分け
Technical Bulletin マウス造血幹細胞の新マーカーEPCRによる同定と分離
多発性骨髄腫検出の感度を上げるCD138形質細胞分離
ヒト臍帯血からのCD34 +細胞の分離
小量の臍帯血サンプルからの赤血球の除去
Video 流し捨てるだけの簡単な細胞分離:EasySep
96ウェルプレートで細胞分離できる磁石:EasyPlate
マウス免疫細胞分離の比較:EasySep vs カラム法
カラムを使用しない細胞分離:EasySep
CAR-T細胞の製造フロー:分離、活性化、増殖

ネガティブセレクションによる免疫磁気細胞分離
ネガティブセレクション免疫磁気細胞分離法は、特定の細胞表面タンパク質を標的とする抗体またはリガンドを使用して、除去のために不要な細胞タイプを標識することを含みます。この技術リソースとプロトコルのコレクションを使用して、ネガティブセレクションによる免疫磁気細胞分離のサポートを受けてください。トピックには、ネガティブセレクションで細胞回復を改善する方法と、ポジティブまたはネガティブセレクション戦略を選択する方法が含まれます。

Tech Tip 細胞分離技術(STEMCELL Technologies社)の違いと選択
同一サンプルから複数細胞タイプを連続分離
細胞分離用サンプルの評価と回収率の計算
多様な組織サンプルからの細胞分離
細胞分離に適したバッファー組成と血清の代替
ネガティブ分離で細胞の回収率を上げる方法
複数サンプルから同時に細胞分離できる磁石:EasyEights
サンプルの容量と細胞数が少ない時の対処方法
造血前駆細胞の分離製品と選択
血中循環腫瘍細胞(CTC)の分離製品と選択
RoboSep-SとEasySep磁石の清掃
ネガティブ分離とポジティブ分離の使い分け
Technical Bulletin フローサイトクロスマッチ(FCXM)のための迅速な細胞分離
自然リンパ球(ILC)のソーティング効率を上げる予備濃縮
Video 流し捨てるだけの簡単な細胞分離:EasySep
96ウェルプレートで細胞分離できる磁石:EasyPlate
マウス免疫細胞分離の比較:EasySep vs カラム法
全血から直接に細胞分離(EasySep Direct, Easy 50磁石)
全血から直接に細胞分離(EasySep Direct, EasyEights磁石)
全血から直接に細胞分離(EasySep Direct, EasySep磁石/Big Easy磁石)
大容量でポータブルな細胞分離用磁石:Easy 50
ピペットでサンプルを吸引する方法(EasyEights磁石)
カラムを使用しない細胞分離:EasySep

自動免疫磁気細胞分離
免疫磁気細胞分離の自動化は、サンプル処理の標準化とサンプルスループットの向上に役立ちます。RoboSep™機器による細胞分離の自動化の詳細については、ビデオ、ガイド、ケーススタディなどの以下のリソースを使用してください。RoboSep™-Sでの実行の開始や、単一のサンプルから複数の細胞タイプを取得するための順次細胞分離などのトピックに関するサポートを見つけてください。

Tech Tip 同一サンプルから複数細胞タイプを連続分離
RoboSepチップヘッドの清掃
造血前駆細胞の分離製品と選択
RoboSep-SとEasySep磁石の清掃
Technical Bulletin 多発性骨髄腫検出の感度を上げるCD138形質細胞分離
キメリズム解析のための細胞分離の完全自動化
Video RoboSepの使い方
RoboSep-Sの使い方 1:チップヘッドの清掃
RoboSep-Sの使い方 2:スタート前の準備
RoboSep-Sの使い方 3:プロトコールの選択
RoboSep-Sの使い方 4:サンプルと試薬の設置
RoboSep-Sの使い方 5:分離終了後の操作
RoboSep-Sの使い方 6:回転台の取り外しと清掃
RoboSep-Sの使い方 7:装置のシャットダウン

赤血球の除去
機能研究またはダウンストリームアッセイのために特定の細胞タイプを血液から分離する場合、赤血球(RBC)の枯渇が必要になる場合があります。ここでは、細胞分離の前に血液サンプルからRBCを枯渇させる方法に関する技術的なヒントとプロトコルを紹介します。これには、さまざまな種類の血液サンプルからRBCを除去する方法や、塩化アンモニウムを溶解せずにRBCを枯渇させる方法が含まれます。

Protocol 全血から多形核細胞(顆粒球)を塩化アンモニウム溶血で調製する方法
Technical Bulletin 新鮮血液サンプルからの赤血球除去
少量の臍帯血サンプルからの赤血球除去
Video 全血から有核細胞を赤血球凝集で分離(HetaSep)
少量サンプルからの赤血球除去(HetaSep)

沈降
沈降は、赤血球を除去し、血液サンプルから有核細胞を取得するための1つの手法です。沈降やHetaSep™などの製品を使用して血液サンプルから有核細胞を取得する方法については、ステップバイステップの説明ビデオを含むこれらのリソースをご覧ください。

Technical Bulletin 新鮮血液サンプルからの赤血球除去
Video 全血から有核細胞を赤血球凝集で分離(HetaSep)
少量サンプルからの赤血球除去(HetaSep)

サンプルの準備と保管

シングルセルサスペンジョン(単一細胞懸濁液)の調製
単一細胞懸濁液から始めることは、下流の細胞分離を成功させるために不可欠です。これらの技術リソースを調べて、組織または細胞培養サンプルから単一細胞懸濁液を調製するのに役立ててください。マウスの脾臓から単細胞懸濁液を調製する方法や、塊状の細胞懸濁液を処理する方法などのトピックに関するプロトコルとサポートがあります。

Protocol シングルセル懸濁液の細胞凝集をDNase Iで減らす方法
マウス脾臓からシングルセル懸濁液を調製する方法
フローサイトメトリーのためのマウス骨髄細胞の分離・染色方法
Technical Bulletin 細胞分離用サンプルの評価と回収率の計算
多様な組織サンプルからの細胞分離
組織解離のためのプロトコール集

分離された細胞の保存
分離された免疫細胞の保存と凍結保存は、研究ワークフローの重要なステップです。分離直後に細胞を分析できない場合の細胞の保存方法と、後で使用するためのサンプル保存の検討に関するリソースを以下に示します。

Protocol 凍結プライマリーセルを解凍する方法
末梢血単核細胞(PBMC)を凍結保存する方法
Tech Tip 臍帯血サンプルの保存
フローサイトメトリーと保存のための細胞の冷蔵、冷凍、固定

血液サンプルの準備方法
全血は、血漿、赤血球、血小板、および有核白血球で構成されています。白血球除去システム(LRS)コーンなどの正常な末梢血から収集された濃縮白血球アフェレーシス製品は、全血と比較して多数の末梢血単核細胞(PBMC)で構成されています。分離する細胞の種類と開始血液サンプルソースに応じて、さまざまな手法を使用して、下流の細胞分離用の開始血液サンプルを処理および準備します。以下を調べて、全血サンプル、ロイコパック、LRSコーンを処理するためのプロトコル、および下流の細胞分離の方法を見つけてください。

Protocol Leukopak(アフェレーシス採取白血球)から細胞分離する方法
古い血液サンプルから顆粒球を除去する方法
全血からバフィーコートを調製する方法

関連製品

記事に関するお問い合わせ