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注目の製品情報

2020/06/05

【COVID-19研究関連】Meridian Bioscience社 ウイルスRNAコントロール・RT-qPCR試薬

Meridian Bioscience社では、COVID-19をはじめ、ウイルスRNAの検出を目的とした研究にご利用可能な試薬を研究開発しております。


ウイルスRNAコントロール試薬

遺伝子検査における『ウイルス溶解・RNA抽出』の重要性

  • 『ウイルスの溶解』『RNAの抽出』を的確に行うことは、遺伝子試験における偽陰性を防ぐために極めて重要です。
  • それでは、これらのステップでの操作が適切かどうかを確認するにはどうしたらよいのでしょうか?

ウイルスRNA抽出コントロールとは?

Meridian Bioscience社の「VLP-RNA Extraction Control」は、回収したウイルスの溶解と遺伝子抽出のステップが正しく行われていることを確認できる画期的な試薬です。

ウイルスPCR検査における偽陰性(false negative)の原因

RT-qPCR-failure.png

VLP-RNA Extraction Controlの特徴

  • ウイルスを模倣したVLPによってカプセル化されたRNAコントロール
  • 感染性がなく、運搬・取り扱いが容易
  • 定量PCRにお使いいただける検出試薬(プライマーとプローブ)をあわせて提供
  • プローブの色素は、Cy5(蛍光波長 670 nm)とHEX(蛍光波長 555 nm)の2種類から選択

VLP-RNA Extraction Controlを用いた検出データ例

VLP-RNA Extraction Controlを用いた解析で、ウイルスの溶解とRNA抽出のステップにおける異常の有無を確認できます。

VLP-RNA Extraction Controlを用いたRT-qPCRの結果

VLP-RNA-Data-2.png

Meridian BIoscience社のISOLATE II RNA Mini Kitを用いてRNA抽出を行う際に、キット推奨の方法で調製したサンプル(赤)は増幅が見られました。一方で、不適切な方法により抽出したサンプル(緑)では、顕著な増幅が見られませんでした。

VLP-RNA Extraction Control 製品情報

製品内容

  • VLP-RNA Extraction Control ー ウイルスRNA 抽出コントロール試薬
  • VLP Detection Mix (Red or Orange) ー 抽出RNA 検出試薬

製品リスト

 

商品名 商品コード 容量
VLP-RNA Extraction Control Red
(Emission Cy5, 670 nm)
MERMDX068-1 1 mL
(~1x104 copies/µL)
MERMDX068-20 20 mL
(~1x104 copies/µL)
VLP-RNA Extraction Control Orange
(Emission HEX, 555 nm)
MERMDX069-1 1 mL
(~1x104 copies/µL)
MERMDX069-20 20 mL
(~1x104 copies/µL)

ワンステップRT-qPCR試薬

簡単な操作で高感度な遺伝子増幅を実現

Meridian Bioscience社のワンステップ逆転写-定量PCR試薬ミックスは、
ウイルスの溶解 → RNA抽出 → 逆転写反応 → 定量PCR反応
のすべてをワンステップでおこなうことが可能な試薬ミックスです。

Inhibitor-Tolerant RT-qPCR Mixでは唾液やスワブからでも煩雑な作業不要で増幅が可能です。

WorkFlow.png

SARS-CoV-2遺伝子などRNAウイルス由来の遺伝子を、少ない手順で高感度な検出を可能にします。
それぞれ特徴を持った4種類の製品をご紹介します。

ワンステップRT-qPCR試薬の特徴(共通)

  • 迅速・自動化・ハイスループットの系に適しています
  • RNA・DNAともに低コピー数からの増幅・検出が可能です
  • 多様な検体に対応しています

ワンステップRT-qPCR試薬のご紹介

Inhibitor-Tolerant RT-qPCR Mix

Inhibitor-Tolerant RT-qPCR Mixは、唾液・喀痰・糞便などの検体から抽出ステップをせずに効率良く増幅させることが可能な試薬です。

Inhibitor-Tolerant RT-qPCR Mixを用いたAmplification Plot

onesteppcr-4.png

インフルエンザAウイルス(一本鎖RNA)をスパイクさせた唾液スワブ検体を用いて、Inhibitor-Tolerant RT-qPCR MixまたはFast 1-Step RT-qPCR Mixで増幅反応を比較しました(最終濃度:それぞれ10%)。

Inhibitor-Tolerant RT-qPCR Mixは唾液スワブ検体の解析において、高いパフォーマンスを示しました

Lyo-Ready 1-Step RT-qPCR Mix

Lyo-Ready 1-Step RT-qPCR Mixはウイルス検体向けに最適化された試薬で、凍結乾燥品としてお届けします。

Lyo-Ready 1-Step RT-qPCR Mixを用いたAmplification Plot

onesteppcr-3.png

不活化させたロタウイルスA(RNAウイルス)とアデノウイルス(DNAウイルス)を混合させた粗抽出サンプルから希釈系列を調製し、Lyo-Ready 1-Step RT-qPCR Mixを用いてマルチプレックスで各ウイルス遺伝子を増幅しました。

Lyo-Ready 1-Step RT-qPCR Mixは、RNAウイルスおよびDNAウイルス両方のターゲットの同時検出が可能です。

Lyo-Ready 1-Step RT-qPCR Mix

Lyo-Ready 1-Step RT-qPCR Mixは、グリセロール不含の凍結乾燥品としてお届けします。

Lyo-Ready 1-Step RT-qPCR Mixを用いたAmplification Plot

onesteppcr-2.png

2%に希釈したマウス全血検体を用いて、γ-アクチン遺伝子のの増幅反応をRT-qPCRで確認しました。

Lyo-Ready 1-Step RT-qPCR Mixは、血液サンプルから確実に増幅させることができます。

Fast 1-Step RT-qPCR Mix 

Fast 1-Step RT-qPCR Mixは、ベーシックなワンステップRT-qPCR試薬です。

Fast 1-Step RT-qPCR Mixを用いたAmplification Plot

onesteppcr-1.png

Taqプローブを用いたアッセイを、Fast 1-Step RT-qPCR Mixと競合他社試薬を用いて比較した例です。それぞれ10倍希釈系列を5段階に調整し、βアクチン遺伝子の増幅をRT-qPCRで調べました。

Fast 1-Step RT-qPCR Mixは、競合他社試薬と比べて10倍以上の増幅感度を示しました。

 

ワンステップRT-qPCR試薬 製品情報

製品リスト

 

商品名 商品コード 梱包単位
Inhibitor-Tolerant RT-qPCR Mix MERMDX016-200 1 mL (200反応分)
MERMDX016-10000 50 mL (10,000反応分)

Lyo-Ready 1-Step RT-qPCR Virus Mix

MERMDX062-1000 10 mL (1,000反応分)
MERMDX062-10000 100 mL (10,000反応分)
Lyo-Ready 1-Step RT-qPCR Mix MERMDX024-1000 10 mL (1,000反応分)
MERMDX024-10000 100 mL (10,000反応分)
Fast 1-Step RT-qPCR Mix MERMDX032-1000 10 mL (1,000反応分)
MERMDX032-10000 100 mL (10,000反応分)

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