STEMCELL Technologies NaiveCult NaiveCult Expansion Medium
- 研究用
NaïveCult™ Expansion Medium (ST-05590) は、リセットされたナイーブ型ヒトES/iPS細胞 (hPSC) を増殖するための、組成の明確 (defined) な培地です。
本品で培養したリセットナイーブhPSCは、縁が屈折した、明るい位相差像の一様なドーム型コロニーを示し、リセットされたナイーブ状態に関連する遺伝子発現プロファイルを維持します (Guo et al. Stem Cell Reports, 2016; Guo et al. Development, 2017; Takashima et al. Cell, 2014)。また、再プライミング後に3胚葉すべてに分化できます。
本品は、Austin Smith による t2iL + Gö の組成に基づき、英国ケンブリッジ大学 Cambridge Stem Cell Institute からライセンスを受けて開発されました。NaïveCult™ Induction Kit (ST-05580) で誘導したリセットナイーブhPSC、導入遺伝子で誘導したリセットhPSC (Takashima et al. 2014)、または胚由来のリセットhPSC (Guo et al. 2016) に適用できます。
製品の特長
NaïveCult™ Expansion Mediumをもちいて、ナイーブ型hPSCを拡大培養できます
Figure 1. Schematic of Reversion of Primed to Naïve hPSCs
Primed hPSCs, grown either in mTeSR™1 or TeSR™-E8™ on Corning® Matrigel®, are plated as single cells on inactivated murine embryonic fibroblasts (iMEFs) and treated with Rho-kinase inhibition (10 μM Y-27632) for 24 hours in hypoxic conditions. On day 1, medium is changed to Induction Medium 1 supplemented with a histone deacetylase inhibitor (HDACi) and cells are cultured for 3 days with daily medium changes. On day 4, medium is changed to Induction Medium 2 and cells are cultured until day 11 with daily medium changes. On day 11, hPSCs are passaged as single cells onto fresh iMEFs and subsequently passaged every 3 - 4 days until the end of passage 2 in Induction Medium 2. From passage 3, hPSCs are cultured in Induction Medium 3. Background differentiation will decrease between passage 3 and 8. At this time cells can be transferred into NaïveCult™ Expansion Medium for long-term maintenance and expansion.