図 3. HBECの代表的な形態
PneumaCult™-Ex Plus、PneumaCult™-Ex、または他社培地で培養したP4 HBECの代表的な培養画像。PneumaCult™-Ex Plus（A）で培養した細胞は、PneumaCult™-Ex（B）または他社培地（C）で培養した細胞より小さく、より密に詰まっています。すべての画像は、10倍の対物レンズを使用して撮影。

図 4. PneumaCult™-Ex Plusで培養したHBECは、基底細胞マーカー CD49f、CD271の広範囲な発現を維持
PneumaCult™-Ex Plus（A, D）、PneumaCult™-Ex（B, E）、および他社培地（C, F）で培養したP4 HBECにおいて、基底細胞マーカー CD49f (A, B, C) および CD271 (D, E, F)を免疫細胞化学で検出しました。すべての画像は、10倍の対物レンズを使用して撮影。

図 5. PneumaCult™-Ex Plusで培養したHBECは、CD271⁺CD49f⁺ 細胞の割合がより高い
PneumaCult™-Ex Plus (A), PneumaCult™-Ex (B), および他社培地 (C) で培養したP4 HBECにおいて、基底細胞マーカー発現をフローサイトメトリーで検出しました。PneumaCult™-Ex Plusでは他の培地より高い割合でCD49fとCD271の共発現細胞が存在していました。

図 6. PneumaCult™-Ex Plusで培養したHBECでは、PneumaCult™-ALIを用いた偽重層粘液線毛上皮への分化が改善
PneumaCult™-Ex Plus, PneumaCult™-Ex, または他社培地にP4のHBECを播種した後、P5からP8でPneumaCult™-ALIをもちいてALI分化させました。エアリフトから28日後のALI培養物を固定し、繊毛（AC-tubulin、赤）と杯細胞（Muc5AC、緑）のマーカーに対する抗体で染色しました。核はDAPI（青）で対比染色しました。すべての画像は、20倍の対物レンズを使用して撮影。

図 7. 分化したHBEC(P4)の電気生理的な特徴
PneumaCult™-Ex Plus, PneumaCult™-Ex, または他社培地で拡大培養したHBECをPneumaCult™-ALIでALI培養し、エアリフトから28日後の経上皮電気抵抗 (TEER) (A) 、およびイオンチャネル活動の代表的特徴 (B)を示しています。
Amiloride: ENaC inhibitor. IBMX and Forskolin: CFTR activators. Genistein: CFTR potentiator. CFTRinh-172: CFTR inhibitor. UTP: Calciumactivated Chloride channels (CaCCs) activator.