STEMCELL Technologies STEMdiff STEMdiff Mesenchymal Progenitor kit
- 研究用
STEMdiff™ Mesenchymal Progenitor Kit (ST-05240) は、ヒトES/iPS細胞 (hPSC) から間葉系前駆細胞 (MPC) 様特性を持つ細胞を誘導するのに最適化されたキットです。
本品は、動物性成分フリー (ACF) の誘導培地、増殖培地、および接着基質を含む、組成が明確 (defined) な培養キットです。本品を用いることで、組成が明確な試薬による完全なワークフローのもと、hPSC由来MPCを誘導および拡大培養できます。
製品の特長
STEMdiff™ Mesenchymal Progenitor Kit をもちいて、hPSCから間葉系前駆細胞を誘導し増幅できます
- 血清や動物性成分を含まない組成です
- ヒトES/iPS細胞株から間葉系前駆細胞 (MPC) を効率的に再現性高く作製します
- MPCを3週間で迅速に誘導します
- 作製したMPCは、長期増殖および脂肪・骨芽・軟骨細胞への分化が可能です
間葉系前駆細胞誘導のワークフロー
![Human ES- and iPS-derived MPCs Can Be Further Differentiated Into Adipogenic, Chondrogenic and Osteogenic Lineages](https://cdn.stemcell.com/media/images/data-figures/05240/27025-figure-1.jpg)
フェーズ1では、ヒトES/iPS細胞をmTeSR™1またはTeSR™-E8™培地で培養します。プロトコルの0日目(フェーズ2)に、TeSR™培地をSTEMdiff™ Mesenchymal Induction Mediumで置き換えることにより、初期中胚葉前駆細胞への誘導の準備が整います。4日目(フェーズ3)までに培地をMesenCult™-ACF Mediumに置き換え、初期間葉系前駆細胞(MPC)を誘導します。6日目に、MesenCult™-ACF Attachment Substrateで予めコートされた培養器に細胞を継代します。21日目までに、ヒトES/iPS由来MPCは期待されるMPC特性を示します。
データ紹介
ヒトES細胞 (H9) およびiPS細胞 (STiPS-F016, -F031) 由来MPCの増殖と倍加時間
![Cell Expansion and Doubling Rate of MPCs Derived from Human ES (H9) and iPS (STiPS-F016 and -F031) Cells in MesenCult™-ACF Medium](https://cdn.stemcell.com/media/images/data-figures/05240/27025-figure-2.jpg)
(A)ヒトESおよびiPS細胞株由来MPCの17継代を超える継代あたりの平均細胞増殖は、約9倍および10倍です。(B)ヒトES/iPS由来MPCの細胞数が2倍になるまでの日数は、1.1〜1.4日です。
21日目までに間葉系表面マーカーを発現するSTiPS-F016由来MPCの代表的なフローサイトメトリー分析
![A Representative Flow Cytometric Analysis of STiPS-F016-derived MPCs Expressing Mesenchymal Surface Markers By Day 21](https://cdn.stemcell.com/media/images/data-figures/05240/27025-figure-3.jpg)
STEMdiff™ Mesenchymal Progenitor Kitで作製したヒトiPS由来MPCは、高レベルの間葉系表面マーカー(CD73、CD90およびCD105)と血管周囲マーカー CD146を発現します。MPCは、造血(CD34、CD45)および内皮(CD144)表面マーカーを発現しません。ヒトES由来MPCも同じ表現型を示します。
hPSC由来MPCは、脂肪生成、軟骨形成、骨形成の各系統へ分化可能
![Human ES- and iPS-derived MPCs Can Be Further Differentiated Into Adipogenic, Chondrogenic and Osteogenic Lineages](https://cdn.stemcell.com/media/images/data-figures/05240/27025-figure-4.jpg)
(A)3週間の誘導プロトコルの後、MesenCult™-ACF Mediumで培養した細胞はMPC様形態を示します(40X 倍率)。MPCはさらに、(B)脂肪細胞(オイルレッドO染色、400X 倍率)、(C)軟骨細胞(アルシアンブルー染色、100X 倍率)、(D)骨芽細胞(Fast RedおよびSilver Nitrate染色、100X 倍率)に分化できます。
詳しいデータは、学会発表ポスター(STEMCELL Technologies社)もご覧ください。
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