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注目の製品情報

2020/06/16

「MesenCult」 間葉系幹細胞の分離・培養・分化のための高性能システム

  • 用途別細胞培養

MesenCult™は、間葉系幹細胞(mesenchymal stem cell; MSC)の研究者が細胞培養システムを標準化し、培地のばらつきに関する課題を克服できるよう、STEMCELL Technologies社が開発した包括的で統合された製品シリーズです。基礎研究からトランスレーショナルリサーチまで使用できる、ヒトおよびマウスのMSC専用製品を提供しています。

研究目的に適したMesenCult™製品を選択するため、本稿および製品カタログ(英語)を参照してください。

MesenCult™が使用される理由

MesenCult™を使用して、MSCを誘導、培養、増殖、分化、凍結保存できます。
MesenCult™には、動物性成分を含まない組成から、ヒト血小板溶解物および血清を含む組成まで、さまざまなMSC研究用培地があります。以下に主な特長を示します。

  • 高性能の培養 ヒト・マウスに最適化した培地組成と、従来の培地より優れた性能を提供
  • 包括的 ヒト・マウスMSCの濃縮、増殖、定量(CFU-Fアッセイ)、分化のための、包括的で統合された製品群
  • 標準化 培地と培養条件の標準化でばらつきを最小化し、実験間の再現性を向上
  • 動物性成分フリー Animal Component-Free(ACF)・無血清の条件下でMSCの分離、培養、凍結保存、分化が可能

製品紹介: MesenCult™ - 間葉系幹細胞の分離・培養・分化

データ例: MesenCult™-ACF Plusによるヒト骨髄MSCの優れた増殖

動物性成分フリー(ACF)培地による培養とその意義

間葉系幹細胞(MSC)は、組織工学および再生医療に関わる用途や、遺伝子治療の媒体として、細胞療法において潜在的な有用性を持っています。ウシ胎児血清(fetal bovine serum; FBS)の世界的な供給限界や、移植細胞の免疫拒絶あるいは感染についての懸念から、動物性成分フリー(Animal Component-Free, ACF ※)の培地は治療目的の細胞増殖用に魅力的な代替物になっています。

MesenCult™-ACF培地は、ヒトの初代組織(骨髄および脂肪)由来MSCの分離、コロニー形成能アッセイ、凍結保存、長期増殖、分化を最適化できる動物性成分フリー培地です。これは、血清とヒト・動物由来の成分を全く含まない、現在唯一の完全で統合された培養システムです。動物性成分フリー培地を用いることで、実験上のばらつきが最小限に抑えられ、トランスレーショナルリサーチにおける動物由来成分への曝露に伴う安全性の懸念を解消できます。

※ 動物性成分フリー(Animal Component-Free, ACF) の定義:

  • 完成品には、動物(ヒトを含む)の組織や体液、あるいは動物の組織や体液から単離または精製された成分は含まれていません。
  • 動物細胞株または発酵プロセスで生産されたものを含む、動物または非動物の組み換えタンパク質が含まれることがあります。
  • 動物由来の成分は、特に明記しない限り、製造の2次または3次レベルで原材料として使用されている可能性があります。

ヒトMSC用 MesenCult™

標準化されたMesenCult™培地をもちいて、ヒトMSCを培養および分化させることで実験間のばらつきを減らせます。
培地組成は、動物性成分フリー(ACF)、ゼノフリー(異種成分不含有)、血清含有などから選択できます。

ヒト用 ”動物性成分フリー” のおすすめ製品

製品名 タイプ 用途 特長
MesenCult™-ACF Plus Culture Kit 無血清、動物性成分フリー(ACF) 初代ヒト骨髄と脂肪組織、ならびに拡大培養した細胞からMSCの単離と増殖

MSCの長期培養(>8継代)

初代ヒト骨髄と脂肪組織からのCFU-F検出と計数
・動物性成分フリー
・ヒト初代組織から直接MSCを単離するために最適化
・血清含有培地と比べて優れた細胞増殖
・継代初期の造血細胞混入を著しく低減
・ヒトMSCの効率的なコロニー形成と長期増殖をサポート
・血清含有培地からMSCを移行する際、馴化は不要
MesenCult™-ACF Plus Umbilical Cord Culture Kit 無血清、動物性成分フリー(ACF) ヒト臍帯組織からMSCの誘導および増殖 ・動物性成分フリー
・臍帯組織由来MSCの高い収率と増殖
・MSC特異的マーカーの発現、増殖能と分化能の維持
・他のMesenCult-ACF製品を併用して、完全ACF条件のワークフローを構築可能
MesenCult™-ACF Freezing Medium 無血清、動物性成分フリー(ACF) ヒトMSCの凍結保存 ・動物性成分フリー
・高い回収率と再現性
・ヒトMSCの多分化能と増殖能を維持
・便利で、すぐに使用可能
・MesenCult各培地で拡大培養したMSCに最適化
MesenCult™-ACF Chondrogenic Differentiation Medium 無血清、動物性成分フリー(ACF) MSCのin vitroでの軟骨形成分化 ・動物性成分フリー
・MSCわずか3 x 105個から14日で確実に軟骨形成分化
・軟骨形成の転写産物(Sox9、Acan、Col2a、Col10a)の強力な発現と、肥大軟骨の転写産物(Mmp13)の低発現
・他のMesenCult-ACF培地と併用すれば、MSCの単離から分化まで完全ACF条件で実施可能
・MesenCult各培地で拡大培養したMSCに適用可能

略語:CFU-F = colony-forming unit–fibroblasts; 線維芽細胞コロニー形成単位

ヒト用 その他の製品

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MesenCult ACF Plus Culture Kit

マウスMSC用 MesenCult™

マウスMSCの培養と分化を最適化する、標準化されたMesenCult™培地とサプリメントです。

マウス用製品

製品 タイプ 用途 特長
MesenCult™ Expansion Kit (Mouse) マウス間葉系幹細胞・前駆細胞を、継代0回の早期から拡大培養および濃縮する培地と試薬 ・マウスMSCおよびMEFの誘導と増殖
・CFU-Fアッセイによる、マウスMSCとMEFの計数
・マウスMSCを強力に濃縮し、迅速に増殖可能
・マウスの骨髄、緻密骨、脂肪由来MSCとMEFへの使用に最適化
・3系列分化能を維持した均質なマウスMSCを取得可能
・厳格な原料スクリーニングと品質管理により、ロット間のばらつきが最小限
MesenCult™ Osteogenic Stimulatory Kit (Mouse) マウス間葉系幹細胞・前駆細胞とMEFを骨芽細胞に分化させる完全培地 ・マウスMSCおよびMEFのin vitroでの骨芽細胞分化
・骨発生の研究
・他社製培地を凌駕する骨形成分化能
・骨の分化と成熟に関与する重要な骨形成転写産物を高発現
・強固な骨基質沈着(アリザリンレッド染色で確認)
MesenCult™ Adipogenic Differentiation Kit (Mouse) マウス間葉系幹細胞・前駆細胞とADSC、MEFを脂肪細胞に分化させる培地 ・マウスMSC、ADSC、MEFのin vitroでの脂肪細胞分化 ・MesenCult Expansion Kitで拡大培養されたマウスMSCに適用可能
・使い易い2コンポーネント仕様
・厳密な原料スクリーニングと品質管理により、ロット間のばらつきが最小限

略語:
CFU-F = colony-forming unit–fibroblasts; 線維芽細胞コロニー形成単位
MEF = mouse embryonic fibroblast; マウス胚性線維芽細胞
ADSC = adipose tissue-derived MSC; 脂肪組織由来MSC

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MesenCult™の主要文献 アプリケーション別

ヒト骨髄由来MSCの無血清培養

Miwa H et al. (2012) Xeno-free proliferation of human bone marrow mesenchymal stem cells. Cytotechnology 64(3): 301-8

ヒト脂肪由来MSCの無血清培養

García-Contreras M et al. (2014) Therapeutic potential of human adipose-derived stem cells (ADSCs) from cancer patients: a pilot study. PLoS One. 9(11):e113288

MSCのための3Dバイオリアクター培養システム

Cunha B et al. (2015) Exploring continuous and integrated strategies for the up- and downstream processing of human mesenchymal stem cells. J Biotechnol doi:10.1016/j.jbiotec.2015.02.023

Tan KY et al. (2015) Serum-free media formulations are cell line-specific and require optimization for microcarrier culture. Cytotherapy 17(8): 1152-65

Hervy M et al. (2014) Long term expansion of bone marrow-derived hMSCs on novel synthetic microcarriers in xeno-free, defined conditions. PLoS One. 9(3):e92120

ヒト臍帯由来MSCの無血清培養

Swamynathan P et al. (2014) Are serum-free and xeno-free culture conditions ideal for large scale clinical grade expansion of Wharton's jelly derived mesenchymal stem cells? A comparative study. Stem Cell Res Ther 5(4): 88

Chen G et al. (2014) Human Umbilical Cord-Derived Mesenchymal Stem Cells Do Not Undergo Malignant Transformation during Long-Term Culturing in Serum-Free Medium. PLoS One 9(6):e98565

Chen G et al. (2014) Monitoring the biology stability of human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells during long-term culture in serum-free medium. Cell Tissue Bank 15(4): 513-21

Zhou P et al. (2013) Serum-free culture of umbilical cord-derived mesenchymal stem cells. Zhongquo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi 21(5): 1256-60

ヒト胎盤由来MSCの無血清培養

Zhu Y et al. (2015) Alteration of Histone Acetylation Pattern during Long-Term Serum-Free Culture Conditions of Human Fetal Placental Mesenchymal Stem Cells PLoS One 10(2): e0117068

マウスMSC培養

Breitbach M et al. (2018) In Vivo Labeling by CD73 Marks Multipotent Stromal Cells and Highlights Endothelial Heterogeneity in the Bone Marrow Niche Cell Stem Cell 22(2): 262-276

Zeng Y et al. (2019) CD90low MSCs modulate intratumoral immunity to confer antitumor activity in a mouse model of ovarian cancer Oncotarget 10(43): 4479-4491

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