クロスマッチとは

クロスマッチの種類

• リンパ球細胞障害試験
  ダイレクトクロスマッチ、CDCクロスマッチ（Complement-Dependent Cytotoxicity Crossmatch)、LCT（Lymphocyte Cytotoxicity Test) 法など、様々な名称がありますが、全て同じ検査を指しています。ドナーリンパ球のT細胞とB細胞を分離して行います。
  特徴は抗原‐抗体複合体に補体を添加し、補体を介した細胞障害の有無を蛍光顕微鏡下で判定します。判定は検査者の主観や熟練度などの影響を受けます。
  
  
• FCXM―Flow Cytometry Crossmatch
  フローサイトクロスマッチと呼ばれ、フローサイトメーターを用います。CDCと比較すると感度が高いですが、非特異反応による偽陽性に注意する必要があります。 ドナーリンパ球はT細胞とB細胞を分離せずに全リンパ球を用いて行います。

クロスマッチのための細胞分離

細胞分離

CDCクロスマッチやFCXMにおいて、正しい結果を得るために純度が高い細胞を分離することはとても重要です。STEMCELL Technologies社のEasySep Direct は、クロスマッチのために開発された試薬で、世界で多く使用されています。

• CDCクロスマッチ用試薬：
  ・EasySep Direct HLA Crossmatch T Cell Isolation kit（全血100ｍL）
  ・EasySep Direct HLA Crossmatch B Cell Isolation kit（全血100ｍL）
• FCXM用試薬：
  ・EasySep Direct Human Total Lymphocyte Isolation Kit (全血100ｍL)

特徴

• 免疫磁気ビーズによる分離操作のみで赤血球を99.9％以上除去
• 専用磁石を用いて短時間で簡便に細胞分離可能
• 新鮮全血を用いて最短20分で分離完了
• 比重遠心によるPBMCの回収は不要
• カラムを使用せず、ネガティブ分離のため、細胞への物理的ダメージは最小限
• 専用8連磁石を使用することにより、一度に多検体の処理が可能

ヒト全血からの細胞分離プロトコール

EasySep Directによるヒト全血からの細胞分離は、最短20分で完了します。

EasySep Direct Human Total Lymphocyte Isolation Kitを使用したケーススタディ

TB27033-Cell_Separation_Solutions_Flow_Cytometry_Crossmatch (stemcell.com)

EasySep Direct Human Total Lymphocyte Isolation Kitを用いてFCXMを行ったDr. Robert Liwski の文献を紹介します。Dr. LiwskiはASHIのProficiency Test Committeeのメンバーです。

EasySepを用いた細胞分離例の紹介（「今後の輸血・細胞治療検査室のあり方を考える」セミナー 第6回 吉田先生講演資料）

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