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注目の製品情報

2019/08/08

「ClonaCell」 CHO細胞株、ハイブリドーマをクローニングする革新的ソリューション

  • 細胞分離
  • 用途別細胞培養

「ClonaCellによる呼吸器ウイルス感染の研究」最新情報

ハイブリドーマおよびCHO細胞のクローニングは、半固形(半固体、Semi-solid)クローニングを採用することで従来のクローニング技術と比べてより速く、より効率的に行うことができます。半固形クローニングでは、それぞれの細胞が粘性のある半固形培地中に固定化され、個別のモノクローナルコロニーに成長します。これらのコロニーを回収することで、高確率で単クローン性をもつ多様なクローンを数多く単離することが可能になります。半固形クローニングでは、空のクローニングウェルを低減または排除し、より少ないリソースからより多くのクローンを単離することができます。また、成長の速いクローンと遅いクローンのどちらの単離も容易になるため、クローン多様性が向上し、高生産性または機能性の希少なクローンの発見を容易にします。

半固形のメチルセルロースベースと液体、両方の形態で入手可能な「ClonaCell™-CHO」「ClonaCell™-HY」は、わずか1ステップで高確率の単クローン性およびクローン多様性を達成するのに役立ちます。
適切なClonaCell™培地を選択するため、本稿および 製品カタログ(英語)を併せてご参照ください。

ClonaCellでできること

  • 従来の限界希釈クローニングの課題を克服する、実証済みの半固形クローニング法で時間とリソースを節約
  • マウス、ラット、ヒト、ウサギ、ハムスターの細胞から作製されたハイブリドーマの育成と保存
  • CHO細胞株作製におけるサブクローニング効率の向上

ClonaCell™-HYは研究段階のバイオテクノロジー企業や抗体サービス企業が、抗体開発プロジェクトを迅速に完了するために使用しております
 - Dr. M. Javad Aman, President and CSO, Integrated BioTherapeutics, Inc. (IBT)

ClonaCellが使用される理由

  • 簡便 半固形クローニングで時短。空のクローニングウェルによる資源の無駄を回避
  • 実証済み CHO、ハイブリドーマ、ミエローマなどで優れたクローニング効率と増殖
  • 汎用性 メチルセルロース基礎培地は、細胞の種類に合わせて簡単にカスタマイズ可能。組成、梱包、サイズのカスタマイズに応相談
  • 一貫性 ロット間の再現性を確実にする厳しい性能試験を実施
  • 信頼性 業界で認められた製造の専門知識と、比類のない技術サポート
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動物性成分フリーの液体培地は、CHO細胞の適応、増殖およびクローニングに利用できます。

限界希釈法 vs 半固形クローニング法

従来の限界希釈クローニングに比べて、半固形クローニングでは抗体作製過程を大幅に短縮することができます。

ClonaCell-CHO_3[1][1].jpg

詳しくはこちらを御覧ください

ClonaCell関連 動画マニュアル・ウェビナー

ClonaCellを用いた半固形クローニングの利点

ClonaCellのメリットを解説した動画です

96 Well plate を用いるクローニング法

動画マニュアル:「ClonaCell-CHO」によるCHO細胞のクローニング(96ウェルプレート編)
動画マニュアル:「ClonaCell-HY」によるハイブリドーマのクローニング(96ウェルプレート編)

100 mmディッシュ編は、各製品のページからご覧ください。

単クローン性を損なう可能性がある限界希釈法と、それを克服する方法

Webinar: A Smarter Way To Clone: What You Don't Know About Limiting Dilution Can Hurt Your Probability of Monoclonality
ウェビナーを視聴するには、STEMCELL Technologies社ウェブサイトでの登録が必要になります。

用途別 おすすめClonaCell製品

ハイブリドーマ作製向け

         前濃縮・融合 選択・クローニング 増殖・同定
ClonaCell™-HY Hybridoma Kit
ClonaCell™-HY Medium A
ClonaCell™-HY Medium B
ClonaCell™-HY Medium C
ClonaCell™-HY Medium D
ClonaCell™-HY Medium E
ClonaCell™-TCS Medium
ClonaCell™-HY AOF Expansion & Cloning Medium

CHOとその他の細胞株作製向け

        トランスフェクション・選択 クローニング  増殖・同定
ClonaCell™ FLEX
ClonaCell™-TCS Medium
ClonaCell™-CHO ACF Medium
ClonaCell™-CHO CD Medium
ClonaCell™-CHO CD Liquid Medium
ClonaCell™-CHO ACF Supplement
ClonaCell™-CHO AOF Supplement

STEMCELL Technologies社の細胞株作製用製品のラインナップはこちら>>

ClonaCell各製品の詳細

ハイブリドーマ作製向け

製品名 サイズ 形態 組成、成分 推奨用途 特長
ClonaCell-HY™ Hybridoma Kit 1 kit 下表参照 ClonaCell™-HY Medium A (融合前)
ClonaCell™-HY Medium B (融合)
ClonaCell™-HY Medium C (回復)
ClonaCell™-HY Medium D (選択とクローニング)
ClonaCell™-HY Medium E (回復)
・ClonaCell™-HY PEG (融合)
マウスモノクローナル抗体産生の全ステップ:
細胞融合、半固形クローニング/選択、ハイブリドーマ増殖
・ハイブリドーマの選択とクローニングを1ステップに統合
・シングルセル由来のハイブリドーマが個別にコロニーを形成するため選択とスクリーニングが容易
・過剰増殖による希少クローンの損失を防止
ClonaCell™ FLEX 45 mL 半固形 ・無血清
Chemically defined
Animal component-free
Protein-free
DHFR, GSに適合
・メチルセルロース
・浮遊培養に適応したCHO細胞やハイブリドーマの選択とクローニング用の、半固形カスタム培地の作製
・様々な細胞の選択とクローニング用に、培地を液体から半固形へ変換
・浮遊培養で樹立されたCHO細胞の再クローニング
・様々な細胞に最適化された半固形カスタム培地を作製可能
・既存の液体培地を使用したクローニングを、半固形クローニング法に変換可能
ClonaCell™-HY Liquid HAT Selection Medium 500 mL 液体 DMEM
Pre-selected serum
Hypoxanthine, aminopterin, and thymidine (HAT)
Gentamicin
2-Mercaptoethanol
・L-Glutamine
・細胞融合後のハイブリドーマの選択
・限界希釈法による個別のハイブリドーマのクローニング
液体浮遊培養でのハイブリドーマ選択を簡略化
ClonaCell™-HY Medium D without HAT 90 mL 半固形 DMEM
Methylcellulose
Pre-selected serum
Gentamycin
2-Mercaptoethanol
・L-Glutamine
・ハイブリドーマを1ステップで選択および半固形クローニング(適切な選択剤を併用)
・細胞融合後に使用
・ハイブリドーマの選択とクローニングを1ステップに統合
・シングルセル由来のハイブリドーマが個別にコロニーを形成するため選択とスクリーニングが容易
・過剰増殖による希少クローンの損失を防止

略語:DHFR = Dihydrofolate reductase、GS = glutamine synthetase

ClonaCell™-HY Hybridoma Kitの内容物

製品名 サイズ 形態 成分 用途

ClonaCell™-HY Medium A

500 mL 液体 DMEM
Pre-selected serum
L-Glutamine
Gentamycin
Supplements
・2-Mercaptoethanol
融合前のミエローマ細胞の生育をサポート
ClonaCell™-HY Medium B 500 mL 液体 DMEM
L-Glutamine
Gentamycin
・2-Mercaptoethanol
融合過程で使用
ClonaCell™-HY Medium C 100 mL 液体 DMEM
Pre-selected serum
L-Glutamine
Gentamycin
Supplements
・2-Mercaptoethanol
融合後、HAT選択前にハイブリドーマの生存率を向上
ClonaCell™-HY Medium D 90 mL 半固形 DMEM
Pre-selected serum
L-Glutamine
Gentamycin
Supplements
Hypoxanthine, aminopterin, and thymidine (HAT)
・2-Mercaptoethanol
1ステップで選択とクローニングを実施
ClonaCell™-HY Medium E 500 mL 液体 DMEM
Pre-selected serum
L-Glutamine
Gentamycin
Supplements
Hypoxanthine and thymidine (HT)
・2-Mercaptoethanol
HAT選択後のハイブリドーマの生育と増殖をサポート

CHO細胞とその他の細胞株作製向け

製品 サイズ 形態 組成、成分 推奨用途 特長
ClonaCell™-CHO CD Medium 90 mL    半固形 ・無血清
Chemically defined
Animal component-free
Protein-free
DHFR, GSに適合
・メチルセルロース
・Kolliphor P188 / Pluronic F68
・浮遊培養に適応したCHO細胞の選択とクローニング
・浮遊培養で樹立されたCHO細胞の再クローニング
・浮遊培養に適応したCHO細胞の選択とクローニング
・浮遊培養で樹立されたCHO細胞の再クローニング
ClonaCell™ FLEX 45 mL 半固形 ・無血清
Chemically defined
Animal component-free
Protein-free
DHFR, GSに適合
・メチルセルロース
・浮遊培養に適応したCHO細胞やハイブリドーマの選択とクローニング用の、半固形カスタム培地の作製
・様々な細胞の選択とクローニング用に、培地を液体から半固形へ変換
・浮遊培養で樹立されたCHO細胞の再クローニング
・様々な細胞に最適化された半固形カスタム培地を作製可能
・既存の液体培地を使用したクローニングを、半固形クローニング法に変換可能
ClonaCell™-CHO CD Liquid Medium 500 mL 液体 ・無血清
Chemically defined
Animal component-free
Protein-free
DHFR, GSに適合
・Kolliphor P188 / Pluronic F68
・浮遊培養に適応したCHO細胞の培養
・選択とクローニングのためのCHO細胞の馴化
・半固形クローニング後のCHO細胞の増殖
CHO細胞の限界希釈クローニング(ClonaCell™-CHO ACF Supplementを併用)
・CHO細胞の凍結保存(DMSO使用)
Chemically defined、Animal component-free、Protein-freeの条件下でCHO細胞を増殖可能
・他のClonaCell™全製品に適合
ClonaCell™-CHO ACF Medium 90 mL 半固形 ・無血清
Animal component-free
DHFR, GSに適合
・メチルセルロース
Supplements
・Kolliphor P188 / Pluronic F68
・浮遊培養に適応したCHO細胞の選択とクローニング
・浮遊培養で樹立されたCHO細胞の再クローニング
・組み換えタンパク質と合成成分のみ含有
・Chemically defined、Protein-freeの培地と比べてCHO細胞のシングルセルクローニング効率が高い(特に、低い播種密度で)
ClonaCell™-CHO ACF Supplement 2.5 mL 液体 ・無血清
Animal component-free
DHFR, GSに適合
・Supplements
Chemically defined、Protein-freeの培地に添加して、シングルセルクローニングおよび増殖中のCHO細胞の生育を促進
・CHO細胞増殖のサポート
・組み換えタンパク質とChemically definedな成分のみを含む40倍濃縮液
・血清や加水分解物を含まない
ClonaCell™-CHO AOF Supplement 2.5 mL 液体 ・無血清
Animal origin-free
・フェノールレッドフリー
Chemically defined、Protein-freeの培地に添加して、シングルセルクローニングおよび増殖中のCHO細胞の生育を促進
・CHO細胞増殖のサポート
・組み換えタンパク質とChemically definedな成分のみを含む40倍濃縮液
・イメージングにも最適
ClonaCell™-TCS Medium 80 mL 半固形 ・血清含有
・メチルセルロース
2-Mercaptoethanol
・L-Glutamine
・浮遊または接着培養のCHO細胞およびその他の細胞株の、選択、クローニング、再クローニング
・高いクローニング効率と確実なコロニー形成を要する用途
様々な細胞株で高いクローニング効率と確実なコロニー形成をサポート(CHO-K1、CHO-S、HEK-293、B16F-10、BaF / 3、BHK-1、FD-5、Jurkat Daudi、Molt4、UT-7など)

略語:DHFR = Dihydrofolate reductase、GS = glutamine synthetase

ClonaCellの主要文献 アプリケーション別

抗コロナウイルス抗体作製(ハイブリドーマ作製)

細胞株作製

異なる動物種でのハイブリドーマ作製

薬理学と創薬

免疫学研究

がん研究

関連リンク

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