STEMCELL Technologies STEMdiff STEMdiff SMADi Neural Induction Kit
- 研究用
STEMdiff™ SMADi Neural Induction Kitは、ヒトES/iPS細胞(hPSC)から高効率に神経誘導する培地キットです。組成の明確な無血清培地、サプリメントで構成されています。
本品は、STEMdiff™ Neural Induction Medium(ST-05835)と、STEMdiff™ SMADi Neural Induction Supplementを組み合わせたキットで、TGF-β/BMP依存性のSMADシグナル伝達を阻害して分化を誘導します。その結果、分化困難な細胞株でさえも効率的に神経誘導することができます。
胚様体(Embryoid body; EB)または単層培養のプロトコルで神経前駆細胞(NPC)を作製できます。得られる培養物には、SOX1、Nestin、PAX6を発現する中枢神経系(CNS)型NPCが豊富に含まれます。
本品で作製したNPCをシングルセルとして継代し、STEMdiff™ Neural Progenitor Medium(ST-05833)で増殖させることができます。NPCはまた、ニューロンとグリアに分化させることもできます。
製品の特長
STEMdiff™ SMADi Neural Induction Kitで、hPSCから効率良く神経誘導
- 組成が明確な無血清培地
- hPSCからCNS型NPCへの変換を効率的に促し、不要な非CNS細胞型への分化は抑制
- 分化が困難なhPSC株でさえ効率的に神経誘導
- ニューロンとグリアへの下流分化の効率を改善
- 胚様体(EB)と単層培養(モノレイヤー)、両方の神経誘導プロトコルに対応
- 各種TeSR™培地で維持された細胞株から再現性良く分化
- 便利で使用しやすいフォーマットとプロトコル
データ紹介
PAX6とSOX1を高発現する神経前駆細胞(NPC)の作製をサポート
mTeSR™1またはTeSR™-E8™で培養したhPSCから、STEMdiff™SMADi Neural Induction Kitを使用して、胚様体または単層プロトコルによりNPCを誘導できます。生じるNPCは、CNS型NPCマーカー PAX6およびSOX1を発現します。
さまざまなhPSC株からNPCを安定して作製
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複数のヒトES/iPS細胞株(mTeSR™1またはTeSR™-E8™で培養)から単層培養プロトコルで神経誘導し、7日後に細胞を回収してPAX6、SOX1およびSOX10抗体で免疫染色しました。ハイコンテンツイメージャー ImageXpress Microにより培養ウェル全体の陽性核をカウントし、画像化および定量化しました(細胞株ごとにn = 3の複製)。
STEMdiff™SMADi Neural Induction Kitで作製した神経前駆細胞は非常に高レベルのCNS型マーカー PAX6とSOX1を発現し、神経堤マーカー SOX10の発現は低~非検出レベルであることが示されました。
ニューロンとアストロサイトへ効率よく分化できるNPCを取得
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mTeSR™1で維持されたhPSCから胚様体(EB)プロトコルで誘導した神経前駆細胞を、さらにSTEMdiff™ Neuron Differentiation / Maturation Kit、STEMdiff™ Astrocyte Differentiation / Maturation Kit、およびSTEMdiff™ Dopaminergic Neuron Differentiation / Maturation Kitを用いて前脳ニューロン、アストロサイト、およびドーパミン作動性ニューロンへと分化させました。
mTeSR™ Plusで維持培養したhPSCからもNPCを作製
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ヒトES細胞(H9)および iPS 細胞(STiPS-M001)を(A)mTeSR™1 (培地交換を毎日実施) または(B)mTeSR™ Plus (培地交換をより低頻度で実施) で維持培養した後、STEMdiff™ SMADi Neural Induction Kit をもちいた胚様体 (EB) プロトコルにて神経前駆細胞を誘導しました。
mTeSR™1とmTeSR™ Plusの両培地で維持培養したhPSC由来の神経前駆細胞はともに、EB再播種後に神経ロゼット(矢印)を明瞭に形成します。
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